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cck8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的原理是什么?

更新時(shí)間:2023-10-13   點(diǎn)擊次數(shù):5141次
  cck8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒是一種常用于評(píng)估細(xì)胞增殖和生存能力的試劑。它基于雙氮唑黃(WST-8)的化學(xué)反應(yīng)原理。WST-8是一種水溶性二硫蘇糖鹽,當(dāng)與電子傳遞介質(zhì)1-甲基四氫唑硫代甘汞(MTS)混合時(shí),可以通過(guò)細(xì)胞內(nèi)還原酶的活性來(lái)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量。
 
  在cck8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒中,WST-8與MTS以及一種電子傳遞介質(zhì)PMS(鄰苯二酚硫酸鹽)混合。當(dāng)此混合物加入到細(xì)胞培養(yǎng)體系中時(shí),細(xì)胞內(nèi)的還原酶(如脫氫酶等)會(huì)將WST-8還原成形成橙色產(chǎn)物的可溶性熒光物。這個(gè)橙色產(chǎn)物的量與細(xì)胞數(shù)量成正比。
 
  在實(shí)驗(yàn)中,將待測(cè)的細(xì)胞接種在培養(yǎng)皿或孔板中,并進(jìn)行不同處理組和對(duì)照組。接下來(lái),將CCK-8試劑加入每個(gè)孔中,并進(jìn)一步孵育一段時(shí)間,使細(xì)胞內(nèi)的還原酶與試劑發(fā)生反應(yīng)。在反應(yīng)結(jié)束后,通過(guò)測(cè)量溶液中產(chǎn)生的橙色產(chǎn)物吸光度的變化,可以間接地評(píng)估細(xì)胞數(shù)量。
 

cck8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

 

  使用吸光度檢測(cè)儀器,以450納米作為測(cè)試波長(zhǎng),測(cè)量樣品的吸光度值。吸光度值的增加與細(xì)胞數(shù)量的增加成正比。通常,吸光度值越高,說(shuō)明細(xì)胞數(shù)量越多,代表細(xì)胞增殖能力較強(qiáng);相反,吸光度值較低則表示細(xì)胞數(shù)量較少,代表細(xì)胞增殖能力較弱。
 
  總結(jié)起來(lái),cck8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒利用細(xì)胞內(nèi)的還原酶活性將WST-8還原成可溶性熒光物,通過(guò)測(cè)量熒光物的吸光度變化,間接評(píng)估細(xì)胞數(shù)量,從而達(dá)到評(píng)估細(xì)胞增殖和生存能力的目的。這種方法簡(jiǎn)便、快速,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)和藥理學(xué)研究中。

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